G418溶液(50mg/ml)
G418 Solution(50mg/ml)
● 產品包裝:
產品編號
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產品名稱
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產品包裝
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說明書
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GM34581S
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G418溶液(50mg/ml)
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20 ml
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1份
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● 產品簡介:
G418是一種氨基糖苷類抗生素(MW: 692.71,Molecular formula: C20H40N4O10?2H2SO4,CAS: 108321-42-2),在細菌,酵母,原生動物,高等植物及哺乳動物這類原核或真核細胞中抑制蛋白合成,廣泛應用于轉化了含抗新霉素基因質粒的真核細胞的篩選。G418通過抑制轉座子Tn601,Tn5 的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞產生毒素。當neo基因被整合進真核細胞DNA后,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶(NPT)的高效表達,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以廣泛應用。
由于每種細胞對G418的敏感性不同,而且不同的廠家生產的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定G418的最佳篩選濃度。具體如下:將細胞稀釋到1000個細胞/ml,在100μg/ml-1mg/ml的G418濃度范圍內進行篩選,選擇出在10~14天內使細胞全部死亡的最低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。
G418溶液已經0.22μm抽濾除菌,可以直接使用。
細胞系或機體
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G418推薦濃度(μg/ml)
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中國倉鼠卵巢細胞
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700-800
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Madin-Darby犬腎細胞
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500
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人上皮A431細胞
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400
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猿CV-1細胞
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500
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盤基網柄菌屬
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10-35
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植物
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10
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酵母
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125-500
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● 保存條件:
4-8℃保存,濕冰運輸。有效期2年。
● References
1. Loebenberg, D., et
al., G 418, a new micrommomospora-produced aminglycoside with activity
apainst protozoa and helminths: antiparasitic activity. Antimicrob. Agents Chemother., 7, 811 (1975).